黑木耳菌种怎么做（木耳菌种的制作方法）

　　最近几年，黑木耳的种植规模扩大以后，制种期间不规范的操作方式，导致黑木耳的产量与质量受到了一定影响，菌丝到了出耳期间，容易受到霉菌的污染，引起耳片变薄，流耳或烂耳的现象发生，使种植户的经济效益大打折扣。如何才能制作出优质的菌种，种出肥厚的黑木耳？今天就来分享一下菌种制作方面的内容，给种植户一些参考。

　　制作完成的菌种

先来了解一下制作黑木耳菌种要用到的设备

　　1、培养室及培养架：在规模化的黑木耳栽培基地，就会修建培养室来培养菌种，大小可以根据栽培规模来定，一般在30~50平方米，室内要有调控温度与湿度的设备，棚顶要安装无动力换气扇，保证室内的空气新鲜。按照培养室的面积，要焊接几个用来制作菌种的培养架，架子的宽度为40~45厘米，长度没有特别限制，保持4~6层，每一层之间的距离在50厘米左右。

　　2、培养基的分装容器：培养菌种用到的分装容器有烧杯、漏斗、试管等，在培养菌种时，试管用得最多的就是18毫米×180毫米、20毫米×200毫米这两种规格。培养出来的原种要用850毫升、口径小于4厘米、耐高温的玻璃瓶存放，栽培种可以用原种的容器存放以外，还可以用耐高温的塑料袋替代使用。

　　菌种培养室

　　3、制作培养基要用到的设备：制作培养基要用到的设备主要由罐体、过滤器、控制器三部分组成，罐体上面有电动机和检测PH值的装置，灌口的位置有加料口与排气管，培养基就从加料口放进罐体。罐体里面有搅拌器，放入培养基和培养液，启动设备，搅拌器就可以工作，用来培养菌种。培养菌种需要的氧气从罐体的管道进入，产生的水分从中间的冷却水出口流出，罐体底部就是放料口。

　　4、摇床：在一些规模较小的黑木耳栽培场所，没有专业的菌种培养设备，也可以用摇床来制作菌种。利用生物发酵的技术，菌基在发酵罐液态发酵，经过摇床操作以后，就会生长出菌球，成为黑木耳栽培的种子。利用摇床进行液态菌种发酵，比常规的试管菌种、木屑菌种、棉壳菌种更具优势，操作简单，不会受到专业设备条件的限制。

　　制作菌种设备的平面图

配制培养基的操作步骤

　　1、准备材料：挑选没有发芽，没有变色的优质马铃薯，洗干净以后，把皮削干净，用天平称出200克，切成1厘米左右的小块，再准备酵母粉，用一些温水溶化待用。将切好的马铃薯小块放在1000毫升的清水中，倒入不锈钢的锅中用文火加热，差不多半个小时的时间煮沸以后，再用4层较密的纱布进行过滤，去掉水中的残渣。再把琼脂粉用温水溶化，倒入到过滤好的溶液中，经过搅拌使其充分溶化，加入准备的材料，之后再加水1000毫升搅拌均匀，就可以将溶液装在试管里，装的时候维持试管的1/4~1/5。

　　常用配方材料参考：①马铃薯（去皮）200克，葡萄糖20克，琼脂18～20克，水1000毫升；②马铃薯（去皮）200克，蛋白胨10克，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升；③马铃薯（去皮）200克，磷酸二氢钾3克，维生素B1 2～4片，葡萄糖20克，硫酸镁1.5克，琼脂20克，水1000毫升。

　　提示：在分装培养基时，试管管口位置不要残留液体，以免在培养过程中发生污染，若是试管壁上沾到了培养基，等冷却以后要擦拭干净。分装完成以后，试管口的棉塞要封严实，塞入管内1.5~2厘米，外面留1厘米左右，用手提棉塞的时候，不能发生脱落。之后再按7支试管绑成一捆，用牛皮纸把试管口包紧。

　　配制培养基

　　2、灭菌的操作：培养基在灭菌之前，先要在蒸锅里加水，再把捆好的试管放在锅内，盖上锅盖，把放气阀门关闭以后就可以开始加热，操作方法可以参考灭菌锅的说明，一般在0.15兆帕的压力下，用锅内的蒸汽维持30分钟就可以达到灭菌的效果。时间到了以后，锅内的压力降到了0，就可以把放气阀门打开，过一会就可以拿出试管。试管拿出来以后，等温度降下来将试管呈斜面摆放，棉塞位置要比底部培养基高出30~40毫米。如果温度还没有降下来就进行摆放，试管内会有温差，产生水雾影响培养基的纯度。斜面摆放好以后，就不要再去动试管，为了防止培养基凝固太快，可以在试管上面放一层棉被保温，尤其是在低温的冬天要做好保温措施。

　　利用灭菌锅给培养基灭菌

母种接种的技术方法

　　1、接种前的准备：在接种之前，要把接种室打扫干净，并用药物进行熏蒸消毒，达到无菌的状态，接种人员要换上专业的工作服和工作帽，使用的工具要消毒，双手要用75度的酒精擦洗。将接种要用到的物品摆放到台面，检查一下是否有遗漏，接种区域的下面要用石炭酸溶液进行喷雾消毒，之后再把台面上的紫外灯打开进行照射消毒。

　　接种的工作台面

　　2、接种的方法：将工作台的紫外灯关闭以后，用75度的酒精给双手和母种试管进行消毒，之后再把酒精灯点燃，火焰周围10厘米的区域就是接种的范围，可以避免发生杂菌污染。用左手将斜面培养基的2支试管握住，中指在两支试管中间，使培养基的斜面维持水平，再用右手把试管的棉塞拧松，以便于接种的时候快速拔出。右手拿着接种钩，在酒精灯上燃烧一会消毒，只要是接种要用到的工具，都要进行这项操作，不能忽略。之后再用右手将试管的棉塞拔出来，并用手指夹住，左手拿着两支试管，用酒精灯的火焰灼烧试管口进行消毒。再用消毒过后的接种钩，伸进试管内部，把培养基上面老化的菌丝挑出来，取适量大小的菌块放进试管底部，在放的时候，不能碰到试管的管壁。

　　给试管口进行灼烧消毒

　　小窍门：在酒精灯火焰范围内接种时，接种钩在放菌块时，双手不能抖动，要把菌块放在培养基中间的位置，动作要轻，接种钩不能划到培养基，也不能把菌种沾在管壁上，以免产生污染。抽出接种钩时，也要用火焰灼烧管口和棉塞，在火焰范围内盖上棉塞，每接4~6支试管，就要把接种钩放在火焰上灼烧灭菌，防止培养基发生污染。

　　3、接种的检查：接种完成以后，要把试管放在20~24度的培养箱中进行培养，2天以后就要检查接种的情况，拿出试管观察斜面培养基，如果发现有黄色、绿色的物质，整齐排列的斑点或杂菌，说明培养基已经受到了污染，要及时淘汰。将菌丝生长得洁白、没有受到杂菌染污的菌种，放入2~4度的冰柜中进行保存。

　　操作人员正在进行接种

最后，来说说接种的一些注意事项

　　接种的时间一般没有限制，但在夏季进行接种时，按照正确的灭菌和操作方式，菌种的合格率达到了98%，夏季温度要高一些，培养室也不用加温，原料更丰富，可以节约一定的成本。在给培养基灭菌时，高压蒸汽锅和常压蒸汽锅灭菌时间不一样，要灵活调整时间。在接种过程中，拔棉塞时要轻轻地旋转拔出，不能用蛮力，否则会引起试管振动，使空气进入试管。要检查接种的状况，随机抽取一些试管，放进恒温箱中，之后观察是否有发生杂菌感染的现象。