草莓脱毒苗培育技术（草莓脱毒苗组培快繁技术）

　　草莓在长期的无性繁殖过程中，自身会感染和积累各种病毒，非常会引发草莓病毒，轻者植株生长势减弱，果实变小，产量降低；重者会出现叶片皱缩、植株矮小、果实奇形，品质低劣、产量下降，给种植户带来严重的经济损失。目前还没有有效的药剂防治病毒病。茎尖脱毒、原原种苗在组培室进行，原原种苗的驯化在驯化温室进行，繁殖原种苗、良种苗在生产基地进行。整个过程划分两段：原原种苗——原原种苗的驯化在巫溪县脱毒组培中心进行，原种苗、良种苗繁殖在高山露地良种苗圃进行。

　　1　组培室茎尖脱毒

　　1.1　配制培养基

　　初代培养基以MS培养基成分为基础，添加细胞分裂素每升1.0mg，吲哚丁酸每升0.1～0.2mg，赤霉素每升0.1～0.2mg，蔗糖每升30g，琼酯每升5～7g。

　　大量无素：硝酸铵1650mg，硝酸钾1900mg，磷酸二氢钾170mg，氯化钙440mg，硫酸镁370mg，硫酸锰223mg，硫酸鋅8.6mg，硼酸6.2mg。

　　微量元素：碘化钾0.83mg，硫酸铜0.025mg，氯化钴0.025mg，钼酸钠0.25mg。

　　铁盐：乙二铵四乙酸二钠37.3mg，硫酸亚铁27.8mg，肌醇100mg，甘氨酸2mg。

　　有机成分：盐酸吡哚醇0.5mg，盐酸磺胺素0.1mg，烟酸0.5mg，蔗糖342.31mg。

　　PH：6.6～7.0

　　1.2　选取茎尖，茎尖处理，茎尖接种

　　应在长势良好，没有病虫害的生产田进行，不适宜选择种苗田，选择匍匐茎长的茎尖，选取时间应在匍匐茎旺盛生长期。选择方法：先进行株选，选择植株健壮苗，结果多，果形大，并具有品种典型性状的植株，再匍匐茎长势进行选择，茎尖叶片完全没有展开的匍匐茎，茎粗2～4mm，选好的匍匐茎指前端4～5cm的芽段，先用洗洁精进行冲洗，用自来水反复冲洗干净，接种前先将室内紫外杀灯打开，同时将超净工作台紫外杀菌灯打开，杀菌30～40min，空间消毒，操作人员用75%的消毒酒精棉对操作台面全面消毒。将洗净的茎尖倒入瓶中，加75%的酒精浸泡杀菌2～3min，再用0.1%升汞溶液浸泡5～10min，将升汞溶液倒出后，用无菌水反复冲洗3～5次，再用无菌水浸泡5min，将水倒出，用镊子将酒精棉夹起点着，快速擦洗所有的器具，杀菌消毒，并将周围的工作台面彻底消毒杀菌，为了消毒彻底，要反复多擦洗几遍，最后将镊子和解剖刀，在酒精灯上火烧消毒。紧接着，用镊子取出茎尖，剥去外面的包叶，露出生长点时，用解剖刀的尖部，将大小在0.2～0.3mm剥茎尖生长点剥出，迅速置入瓶中的培养基上，每个瓶中可以接种4～5茎尖，马上将瓶封上，写上品种和接种日期，培养室内温度20～25℃，光照2000～3000个勒克斯，初代培养诱导茎尖形成预伤组织，并分化长出茎叶，每天保证光照14～16h，前20～30d，茎尖产生预伤组织，开始分化新芽，以后新芽不断增加，形成小芽丛，经过30d的生长，芽丛长出茎叶，长成茂密的叶丛。初代培养中就是要解决杂菌污染问题，要及时将杂菌污染的瓶检出。

　　1.3　继代培养

　　初代苗只有茎叶，没有根。一般情况下，初代苗长到3～5cm时，就可以转瓶，专瓶后的培养就叫继代培养，也叫增殖培养，主要是为了扩繁初代苗，继代培养殖需要更换培养基，在MS培养基的基础上，附加细胞分裂素0.3～0.5mg/L，吲哚丁酸0.1mg/L，赤霉素0.1mg/L，蔗糖30g/L，琼酯5～7g/L。细胞分裂素主要促进形成愈伤组织和芽，吲哚丁酸主要是促进形成根，赤霉素主要是促进形成茎叶，继代转瓶接种时，消毒方法同茎尖接种。打开培养瓶用镊子将脱毒苗轻轻夹出，用剪刀将小苗叶片剪掉，只留0.5cm长的叶柄，将单株分开，将叶柄朝上放到继代培养基上，每瓶放4～5个，将瓶口封住，放到培养室中，光照温度同初代培养。在继代培养过程中，茎基部不断分生，最后形成4～6个小芽丛，长成4～6个小苗，经过20～30d培养，当小苗长到3～5cm时，又可以再进行转瓶增殖，以后每20～30d可以转瓶一次，一般可以转接4～5次，每转接一次，小苗的数量榀以增加4～6倍，继代培养的苗叫继代苗，一般没有根，紧接着要进行生根培养，促进继代苗萌发出根系，长出根茎叶都暗有的完整苗。这一环节需要更换培养基，在MS培养基的基础上，要添加吲哚丁酸0.2～0.3mg/L，蔗糖15～20mg/L，琼酯5～7g/L，温度光照和管理同前面初代培养，多数品种经过15～20d，就可以生出4～5条新根，生根率可以达到100%，这时原原种苗就培育好了。

　　2　温室驯化原原种苗

　　2.1　原原种苗圃地块要求

　　在地块的选择上要远离草莓生产区500m以上，前荐要求没种过草莓，尽量不要选择老蔬菜基地，要注意蚜虫的防治工作。

　　2.2　种苗圃

　　驯化原原种苗的温室也叫种圃，种圃要远离草莓区，建防虫网，浇水保温生产设施，驯化过程中所有的措施，都要围绕草莓植株不遭到病毒、蚜虫感染，移栽选用72孔的穴盘，必须做到专用，营养土要用病菌含量少的山土加草炭，同时用棉隆土壤消毒剂，杀菌消毒处理，装盘用木板刮平，用70%的百菌清可湿性粉剂600倍液浇水，用镊子将根理顺，顺插入泥土，然后再浇一次水，用溯料膜覆盖。

　　2.3　种苗圃管理

　　移 栽 后 小 棚 内 的 温 度 1 5 ～ 2 0 ℃ ， 相 对 湿 度 前5～7d80%，以后降至50%，经过2个星期的时间，就可以拆去溯料膜覆盖，驯化期间，温室内温度控制在15～20℃，穴盘保持湿润，一般1～2d喷一次水，注意防虫防病，及时拔出病叶杂草，每隔10d喷施一次蚍虫啉防治蚜虫，每隔20d喷施一次多菌灵防治百粉病，当小苗长到3～5叶，原原种苗就培育好了。繁殖原种苗除了要做防治工作，更重要的是要防治病毒感染。

　　3　高山繁育原种苗、良种苗

　　高山繁育原种苗、良种苗有利于减少病毒积累，高山土壤清洁，病原感染少，虫害少；昼夜温差大，培育健壮种苗保持脱毒种性。

　　3.1　繁育圃地选建

　　地块宜选在水源条件好，地块土壤肥沃、通气、排水的砂壤土，前作未种植烟、马铃薯、蔬菜（西红柿）、草莓等。

　　原种苗、良种苗繁育圃选在红池坝风景区，海拔1400～1600m，5～9月气温15～25℃，降雨量充沛，（平均气温23～24℃以下）和短日照 （日照12.5～13.5小时之内）的条件经 10～15d的诱导开始花芽分化。繁育圃周边种植生物带隔离。

　　3.2　土壤培育

　　选建好的地块合理设计苗床，根据原原种苗数量规划地块大小，做成厢宽1.5m的苗床、苗床高5～10cm，走道0.2m。精细整好的苗床无石块，无异物，土壤疏松，酸性土壤用生石灰调酸，保证土壤酸碱度微酸致中性，并且用高效低毒农药多菌灵消毒、辛硫磷杀灭地下虫。亩用腐熟有机肥2000～3000kg，磷矿粉50kg、硫酸钾15kg、复合肥10～15kg做基肥，全面撒施，将肥土扦细拌匀。苗床做好后，用塑料薄膜盖好，让有机肥充分腐熟，保温保墒保肥，防雨水淋失。

　　3.3　条件控制，抑制花芽生长，防现蕾早花草莓花芽分化好，开花结果早、成熟早、上是早、产量高、品质好。反之，草莓花芽分化差，晚开花晚结果，败花畸形多、产量品质差。首先调理好土壤湿度件；培育适龄健壮苗；调控好温度，用好低温短日照诱导花芽分化；适量断根、摘除老叶，摘除早蕾、早花；使用赤霉素控制花芽的分化和生长。防治病虫害和杂草保证健壮生长。

　　3.4　小温棚覆盖控制过多雨水和遮阳网防强光照高山降水多，三天两日雨。当肥团手捏出水时，必须加盖小拱棚遮挡雨水，防止只长苗、不长根，湿度80%以下。光照过强时要加盖遮阳网。

　　3.5　原种苗

　　由原原种苗出来的第一代种苗叫原种苗，一般在露地进行生产，移栽气温达到10℃以上，定植缓苗后，可以进行第一次药剂防治，以后每隔半个月防治一次，防治药剂可以用蚍虫啉。草莓苗从根茎部能够抽生出多条匍匐茎，当匍匐茎长到20cm时，顶端出现小叶，形成子苗，子苗遇土生根又可以长出多条葡伏茎，形成孙苗，这些子苗、孙苗就是繁殖下一代的种苗。为繁育出更多的优质原种苗，要做好以下工作

　　3.5.1　定植

　　要保持一定的株行距，行距1.5m，株距0.4～0.6m，带土移栽（肥团），栽植深不埋心，浅不露根，浇透水。定植半个月左右为了控制花芽的分化和生长，促进植株茎叶生长，早抽生多抽生匍匐茎，形成较多的子苗，要进行赤莓素处理，喷施浓度为每升水兑50ml赤莓素，对着心叶喷施，每株喷施5～10ml，一般品种喷施一次就可以了，对于匍匐茎萌发较少的品种，可间隔7～10d再喷施一次，到后还要及时摘掉花果，促进多萌发匍匐茎。

　　3.5.2　肥水管理

　　抽蔓盛期，可追施一次NPK复合肥，亩施15kg，也可以结合打药追施千分之3～5的磷酸二氢钾，促进子苗生长，浇水要适当控制，以培养殖壮苗。当匍匐茎都抽生出以后，要及时进行引蔓整理，使其分布均匀，不交叉，避免匍匐茎缠绕一起，匍匐茎长到一定长度时出现子苗时，用潮土将子苗紧紧压住，促进子苗生根，引蔓压土要随着子苗的发生，经常进行；要及时进行变异异株处理，严格去杂去劣，清除变异株，以保持种苗的纯真，与品种正常植株性状不符合的要严格去除。在冬季，要用塑料薄膜进行覆盖，以免冻伤根茎部，春季随着温度的上升，草莓苗开始反青，萌发出新叶，去年的一株原原种苗繁殖出50株以的脱毒苗，当达到4叶1心时，就可以出土了。好的原种苗标准为：4叶1心，茎粗壮，根系发达。

　　3.6　良种苗

　　用原种苗繁殖出第一代种苗就叫良种苗。良种苗就是我们直接用来生产的种苗，良种苗的生产在计划选择上要求与草莓生产区有50m以上的间隔距离，上年没种植草莓的露地，其它管理同原种苗生产的要求一样，主要防病毒感染，增加繁殖系数，除杂去劣。不同的是在当年夏秋季节，可以根据栽培时间的需要分别出葡，满足生产需要。