朱顶红的组织培养技术

朱顶红系石蒜孤挺花属多年生常绿草本植物。其地下具有鳞茎，叶基生、宽椭圆形，长约30cm、宽约15cm；花葶自基部抽出高60cm的伞形花序，着花3～6朵，花冠筒状，具裂片2轮，各3片，开张，花径约8cm，有香气，雄蕊着生花冠筒喉部，花丝基部相连；蒴果，种子大，呈圆形；以鳞茎为宿存器官越冬，5月上旬至6月初开花；花大且色彩浓艳，适应性强而广泛应用于盆栽、切花、园林绿化上。朱顶红园艺品种较多，在北美和西欧鲜切花及盆栽庭园品种的推广多是通过快速繁殖供应市场。红猛士品种系列的朱顶红可用于盆栽，重瓣，花瓣圆形，花大，开花在初夏，四季都可开花，是难得的盆栽和花坛布置材料，价格昂贵。通过组织培养快速繁殖是目前大批量生产满足市场需要的唯一途径，本试验的结果可为朱顶红工厂化生产提供一定的依据。

(1)愈伤组织的诱导

配制初代培养基：初代培养基的主要植物需要成分有大量元素、微量元素、有机成分、激素和蔗糖，准确量取培养基的各成分，并充分混合成混合溶液；然后溶解琼脂，待完全溶化后加入混合溶液、蒸馏水至刻度线，最后将培养基的pH值调至5.8。最适不定芽诱导培养基为MS+0.5mg/LKT+0.5mg/L6-BA，不定芽增殖培养基为MS+1.5mg/LKT+0.05mg/L6-BA，不定根培养基为MS+0.3mg/LNAA。分装培养基：分装引流时要确保培养基不污染瓶口，分装好的培养基做好记号放置于高压灭菌锅中灭菌，放置培养基时不要倒置以免培养基倒流出来。

(2)选择

露地栽培生长健壮的幼龄小球为材料，先在室内消毒过的珍珠岩基质中栽植30天，待新根长出以后，取出用自来水冲净表层，用手术刀去除须根、叶和鳞茎上部的鳞片，只保留鳞茎盘。清理好的鳞茎盘用自来水冲洗干净，并用滤纸吸干水分置于超净工作台上备用。在接种前先用75%的酒精浸泡鳞茎盘30～60秒，用无菌水冲洗一次，然后用0.1%的氯化汞溶液消毒15分钟，最后用无菌水浸泡3～5次、每次5～10分钟，并用无菌镊子不断搅动，去除残留在外植体上的氯化汞。将消毒好的材料放在无菌滤纸上吸干水分，切成5mm×5mm×5mm大小的外植体块接种于已配制好的培养基中，一瓶培养基只接种一个切块。接种好的外植体放置在培养室中培养。培养温度为20～25℃，每天光照时间为10～20小时，光照强度为1000—20001x。愈伤组织块不能切得太小，否则分化会太慢；若愈伤组织块太大很快就会长满瓶，不易取出，故其大小要适宜。

(3)不定芽的生根培养

将继代培养好的小芽切下分别接种于的培养基中。在操作过程中一定要将小芽基部的愈伤组织切除干净，否则根会长在愈伤组织上，影响其成活率。

(4)生根小苗的移栽

试管苗不经过生根可以直接出瓶。小苗生根后先打开瓶口，让小苗在室外适应外界环境，2～3天后取出瓶苗，洗净瓶苗基部的琼脂，最后将小苗移栽至壤土∶腐叶土∶河沙为5∶3∶1(体积比)基质中，成活率可达98%。在洗苗过程中一定要洗净琼脂，防止滋生微生物。

(5)朱顶红取材最好在生长旺盛的春季，以确保其具备较强的分生能力。

在培养过程中发现朱顶红的鳞片与鳞片之间的夹层有凸起出现，上部产生数个小仔球，小仔球上部逐渐变绿，将独立的小仔球转入继代培养基中数日后形成小球丛。朱顶红比较容易感染病菌，最常见的是红斑病。取材时须取无病虫害的部位，或引进种子在试管中播种，生根发芽后再进行培养。若材料丰富，可在解剖显微镜下剥取茎尖的途径来获得无病毒的材料。但此方法会使生长点长得很慢，周期很长，一般从诱导至生根培养需90～120天。据本试验观察发现，组培苗具有一定的驯化现象，经过长时间的继代培养后，只要加入极少量激素也可以达到一开始培养的效果；在炼苗过程中，发现球根花卉一般比较容易成活，试验认为，朱顶红不经过生根可以直接移入基质中，成活率可达98%；朱顶红在组织培养中，芽增殖率高，球小，须进行壮苗培养以后生根，但在增殖培养基MS+lmg/LKT+0.1mg/LNAA中产生不定根，无需进行生根培养；朱顶红的生长需要充足的光照，光照适宜，叶大、厚、肥且具有光泽，花大且艳；光照不足则抽出的花葶开不出花，由顶部花苞逐渐向下枯萎，叶子细且失去光泽、失绿；朱顶红具有很强的向光性。在朱顶红组培中，要特别注意试验的激素配比，在MS+1mg/LKT+0.1mg/LNAA的培养基中既生根又长芽，愈伤组织很少；只加糠基腺嘌呤不长根。结果认为分裂素与生长素比值小，有利于生根，相反则分化形成芽或愈伤组织。朱顶红组培苗炼苗在带有防虫网的玻璃温室内进行，基质要进行消毒，先用甲醛密封熏蒸7天，再打开让甲醛彻底挥发，装入营养钵内待用。