将母种扩繁到原种即二级种,也就是利用母种的菌丝体接入原种培养基中,扩大繁殖培养成原种。 1 原种培养基的制作
1.1 原种培养基的配制
原种培养基的原料为:棉籽壳84%,麸皮15%,石膏1%。再加入60%的水进行搅拌,这样原种的培养基就制作好了。
1.2 原种培养基的分装
分装时选用规格750毫升的原种瓶,将搅拌好的培养基料,装入原种瓶中。装的时候可以边摇边装,装满后再用硬棒砸实,让整瓶料上紧下松,砸实后培养基占原种瓶体积的90%左右。用布将原种瓶内瓶口和外瓶壁擦净,然后塞上化纤棉塞。化纤棉太紧会缺氧,太松又会被污染,以塞好后,拿起棉花塞,瓶不掉最为合适。而且化纤棉塞,由于是化纤产品,没有菌类能分解利用的有机营养成份,即使有点潮湿,棉塞也不会生长霉菌。
1.3 原种培养基的灭菌
原种瓶的灭菌工作要在高压蒸汽灭菌罐中进行。首先向灭菌罐中加入25公斤的水,然后将原种瓶整齐的排放在灭菌罐内部的架子上,一般一次可摆放原种瓶500个左右,最后关上灭菌锅的阀门。在压力为1.8兆帕的条件下,持续灭菌2到2.5小时。经灭菌后的原种瓶要在灭菌罐中自然冷却8小时,待料温降至28摄氏度以下,压力为0时,就可以打开阀门将原种瓶取出,进行下一步的接种工作了。
2 制作原种
2.1 原种接种
原种的接种,也是在无菌箱中进行的。取出酒精棉球擦手,然后点燃酒精灯,拔下试管上的棉花塞,一手持母种试管,在酒精灯火焰上消毒,一手持接种针,就可以进行具体的接种工作了。用接种针从母种试管中,勾取1到1.5平方厘米左右的一小块菌种块,轻轻的放到原种瓶中。然后将原种瓶棉花塞在酒精灯火焰上消毒后让瓶口塞住。在操作过程中,为了避免杂菌感染,要始终将试管口靠近酒精灯火焰。一般情况下,一只母种试管可以接原种6到8瓶左右。这样原种的接种工作就完成了。
2.2 原种培养
接种好的原种瓶要放到原种培养室中进行培养。培养室内有一排排的支架,每排支架间隔40厘米左右,用于摆放原种瓶。原种要在黑暗的环境下培养,所以应该用避光布将门窗挡住。培养室的温度要保持在25到30摄氏度之间,湿度为70%左右。这里要注意的是,原种的培养期间,比较容易感染。为了避免感染我们一定要经常的进行检查,发现有发霉变质的原种瓶要及时清理。经过大概35天的培养,菌丝就会长满原种瓶,这时原种的培养就结束了。 |