大杯伞蘑菇菌种制作

　　大杯伞的原始母种，在有条件的地方可以从子实体上自行提取，但一般的生产单位都是从国家认可的研究单位购买而来，一般只有一两支，却远远不能满足生产上的需要，必须进行逐步繁殖扩大，才能满足它的生产需要，从而扩大大杯伞的栽培面积。。而怎么才能将这一两支的母种扩大呢？这就需要我们再生母种。

　　母种也是一种菌种，它属于菌种生产的第一程序，通常多以试管培养，所以也被称之为“试管母种”。用于繁殖原种。

　　1 母种制作

　　1.1 母种培养基制作

　　母种一般均用马铃薯琼脂做培养基，培养基的配制方法为：先准备200克的马铃薯，要选择新鲜、无芽、无病虫害的，将马铃薯去皮后切成小片，并放入1000毫升的水中煮沸，这样维持15分钟。这时再将马铃薯捞出，用纱布过滤掉马铃薯残渣，再往滤液中分别加入20克葡萄糖，20克琼脂。如果没有葡萄糖，也可以使用白糖。放好后再次将滤液煮沸，待琼脂完全溶解后，我们就可以用玻璃漏斗把滤液分装入，规格为18×180毫米的玻璃试管中。通常滤液的高度不能超过试管的三分之一，再及时地用棉花塞上试管，做到不透气，防止其它杂菌的侵蚀。接着把玻璃试管放入高压消毒锅中灭菌，温度保持在121℃，灭菌30分钟。待消毒锅压力降至零后，把试管取出，要在等滤液未冷却之前将其略微倾斜摆放，一般倾斜度在20度，再过半小时，由于琼脂的凝固作用，试管中的培养基就凝固了，这样母种培养基就做好了。

　　1.2 母种接种

　　接种要在无菌操作室或无菌室中的超净工作台上进行。具体操作方法我们来详细看一下：在接种之前，无菌操作室或超净工作台都预先打开紫外灯照射10-30分钟。这样起到消毒杀菌的作用，工作人员也要在紫外线灯下照射杀菌。这时在操作台上点燃酒精灯，右手持接种针在火焰上灼烧，一直到接种针针尖变红为止，让其在空气中冷却一会儿。左手持两支试管一支为原始母种，另一支为待接种的试管，用右手拔下试管的棉花塞，再用接种针从母种中挑取0.5平方厘米的一小块菌种块，轻轻放在试管斜面上。最后塞上棉花塞，母种接种工作就算完成了，但在操作中要注意一点，不要让菌种块碰到未消毒的试管外壁。

　　1.3 母种培养

　　我们将接好种的试管放置在恒温培养箱中进行母种的培养，温度控制在25℃左右。一般培养一个星期以上就可以发菌丝，进行原种的接种了。

　　2 原种制作

　　2.1 原种培养基的配制

　　接种前我们要准备好原种的培养基，配方为：干杂木屑78%、麦麸20%、糖1%、轻质碳酸钙1%。原种培养基制作方法比较简单：按培养基配方比例准备好各项原辅材料，将各种料混合拌匀，培养料含水量应控制在60%-65%之间，pH值7.5-8为佳。把拌匀的培养料装入750毫升的原种瓶中，装瓶的方法可以直接将原种瓶整齐摆放好，将培养料倒入其中，用小木板将培养料刮进原种瓶中，一定要将其添满压实，装好后还要用水洗干净原种瓶外壁，之后再塞上棉花塞，用牛皮纸将瓶口包好。做好的原种瓶也要放入高压蒸汽灭菌锅中，温度在121℃下灭菌1小时。然后取出原种瓶，待冷却后即可供接种用了。

　　2.2 原种接种

　　原种接种也必须严格按照无菌操作工艺，无菌操作箱要全部封闭。只是在前面有两个开口处，供工作人员操作时放手进去。

　　在接种之前，无菌操作箱预先打开紫外灯照射10-30分钟。操作前工作人员要用酒精将手擦洗干净。这时再点燃酒精灯，右手持接种针在火焰上灼烧至接种针针尖变红为止，而后手持接种针让其在空气中冷却一会儿。左手持一支试管母种，拔下试管的棉花塞，再用接种针从试管母种中挑取1-1.5厘米见方的一小块菌种块，轻轻放入原种瓶中，最后塞上棉花塞。在这里我们在注意一点，接种时的母种瓶口要对着酒精灯的火焰，可以起到防止其他细菌的侵入。而且在接种时，不要让菌种块碰到未接消毒的原种瓶外壁。一般情况下，一支母种试管，通常可移接6-8瓶原种。

　　2.3 原种培养

　　接种好的原种要放置在原种培养室中，培养室内的温度要保持在25-30℃。这个温度下菌丝的生长是最快的。一般15天以后就开始发菌丝。原种培养时间较长，一般为45天，特别注意后期染菌，以免造成栽培种的大批感染。

　　可能观众朋友有疑问了，在这期间有什么管理呢？通常，在原种培养时只要掌握好室内的温度，保证室内光线阴暗，同时每天能适时地通风换气就可以了，每天开窗换气的次数为两次，早晚各一次，开窗时间要掌握在1个小时内。