将马铃薯茎尖进行组织培养以脱去病毒的技术,已在世界上许多国家的无病毒种薯生产上得到应用和推广,对解决马铃薯退化问题起了很大作用。茎尖脱毒技术是将马铃薯植株或分枝或块茎上芽的顶部生长点(分生组织)剥离,应用组织培养的方法,经过4个月左右的培养,将茎尖培养成完整植株(小苗),这个过程就是茎尖脱毒。 马铃薯脱毒操作过程: ①第一步,选择具有本品种典型特征的并经检测确定带毒最少的若干个健壮单株,取其若干块薯块。 ②茎尖组织剥离。把选好的块茎进行高温处理和催芽,取4~5厘米长的芽若干个,经严格消毒后,放在无菌室内超净工作台的解剖镜下,剥去嫩叶,切下带1~2个叶原基、长度在0.3毫米以下的生长点,放入事先配制好培养基的试管中,一管只放一个茎尖生长点。 ③培养。把有茎尖组织的试管放在培养室内培养,40天左右后可以看出是否成活,一般成活率在10%以内。再将成活的茎尖继续培养4~5个月,使其长成为3~4个叶的小植株。然后将其切段分置,继续培养成苗,时间需1个月。 ④病毒鉴定。繁殖的茎尖苗首先要作病毒检测,经过酶联免疫吸附法( ELISA )、化学试剂染色、指示植物接种等方法进行病毒检测,淘汰仍带有病毒的茎尖苗,保留确实无病毒的茎尖苗。剥取、培养的茎尖有几十个或几百个,经过检测最后留下无病毒的茎尖苗只有百分之几或千分之几,淘汰的带毒苗是大量的,因此,培养成活的茎尖苗在未经检测前不能认为是脱毒苗,不宜繁殖推广。只有经过检测而无病毒的茎尖苗才是真正的脱毒苗,才能用于种薯生产。 ⑤将脱毒苗进行切段扩繁及微型薯生产。根据将要生产的原原种数量,有计划地扩繁脱毒苗和微型薯。 |