灵芝母种培养基配方有几种？灵芝母种培养基如何制作？

　　灵芝母种培养基主要供母种转管、保藏及分离、提纯用。一般分为斜面、半高层、高层和平板4种类型。其中最常用的为斜面培养基，它是采用试管分装，灭菌后摆制成斜面而得名。近期有种植灵芝的网友咨询耕种帮：灵芝母种培养基配方有几种？灵芝母种培养基如何制作？以下耕种帮种植网就做简单介绍，供网友们参考。 

 

　　灵芝母种培养基配方

　　1、马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：马铃薯（去皮）200克、葡萄糖20克、琼脂20克、水1000毫升。

　　2、马铃薯蔗糖琼脂培养基（PSA）：马铃薯（去皮）200克、蔗糖20克、琼脂20克、水1000毫升。

　　3、马铃薯综合培养基（CPDA）：马铃薯（去皮）200克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾3克、硫酸镁1.5克、维生素B1 10毫克、琼脂20克。

　　4、完全培养基（RM）：蛋白质2克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾0.46克、磷酸氢二钾1克、硫酸镁0.5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。

　　5、胡萝卜葡萄糖琼脂培养基（CDA）：胡萝卜100克、葡萄糖20克、琼脂20克、水1000毫升。

　　6、糯米粉糖琼脂培养基：糯米粉50克、葡萄糖15克、蔗糖15克、琼脂20克、水1000毫升。该培养基能延缓灵芝菌丝体老化和结皮。

 

　　灵芝母种培养基制作方法

　　1、组分称量：按配方要求正确称取各种营养物质。

　　2、汁液配制：马铃薯、胡萝卜切成丝，加水1000毫升，文火煮沸15~20分钟，4层纱布过滤取汁。糯米粉加水调成糊状，然后稀释成1000毫升悬液。

　　3、培养液配制：以上制成的煮汁或悬液，按配方加入其他营养成分，并补足水至1000毫升。

　　4、调整pH：用广泛pH试纸测定培养液的酸碱度，若过酸，用稀碱液1摩尔NaOH（即称取4克氢氧化钠加水100毫升）滴注调整；若过碱，则用稀酸液1摩尔HC1（即84毫升盐酸加水916毫升）调整。

　　5、加凝固剂：将琼脂（若为条形需剪短）放入配液内，文火煮沸，煮时不断搅拌至溶解。

　　6、分装制棉塞：用20毫米X200毫米试管分装。试管事先洗净，严防油污。新购试管因含游离碱，需用稀盐酸浸泡并清水冲洗，晒干或烘箱烘干备用。

　　分装时将制备的培养基趁热倒入自制的分装器内，装量为试管长度的1/5~1/4。一般生产用少装些，保藏菌种用宜多些。分装时防止培养基沾污管口，一旦沾上应用纱布擦净。

　　棉塞用未脱脂普通棉花，大小与试管口匹配，松紧适中，入试管内部分要求紧贴管壁，无缝隙、无皱褶。管内部分占棉塞总长的2/3。

　　棉塞制作时，分层扯下棉花，叠成外大内小、外薄内厚的棉片，放在左手拇指与食指的“虎口”上，手稍呈拳状，右手拇指用力向“虎口”外挤压，使之露出“虎口”外呈球状的棉花塞头。然后，右手拿取头部，左手将尾部松散的棉花向头部方向倒褶，并使之平滑整齐，顺时针方向旋转入试管口内即成。

　　7、灭菌制斜面：将制塞后的试管，每11或13支，成单数捆扎一起，棉塞端包扎塑料薄膜，防止灭菌时棉塞被冷凝水淋湿而报废。

　　经高压灭菌后，除去包扎的薄膜，直立于容器或框架内，使管内水蒸气向外界蒸发，当温度下降至50度左右时（取试管1支贴放脸上，很烫但能放得住，约为50度左右），即可整捆斜放在斜面板上，斜面长度不超过管长的1/2，冷却后即凝固成斜面。若试管内培养基分装量不均匀，或试管数量不多，则单支排放成斜面。

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